温和型蛋白印迹膜再生液
产品信息:
温和型蛋白印迹膜再生液提供了一种强效但温和的方法,用于去除Western blot 实验中的一抗和二抗。在样本数量有限、需要使用不同抗体分析相同样本的情况下,使用本产品可以节省时间和成本。使用本产品,抗体去除反应在相对温和的条件下进行(室温,20分钟)即可。本产品适用于硝酸纤维素膜和 PVDF 膜,但强烈建议使用PVDF膜,以尽量减少样品蛋白质的损失。蛋白印迹膜经本产品处理后可重复使用,同一张PVDF膜可以再生并重新检测2-5次。
运输和储存方式:
温和型蛋白印迹膜再生液在室温条件下可保存一年。
使用温和型蛋白印迹膜再生液所需设备和材料:
平台式摇床
凝胶成像系统
洗涤缓冲液(含有 0.05% Tween 20 的 TBST 或 PBST)
用于 Western blot 检测的试剂(例如一抗、标记的二抗、化学发光检测试剂)
剥离抗体步骤:
完成Western Blot 发光检测后,将蛋白印迹膜在PBST或TBST中洗涤5分钟。
加入足量的温和型蛋白印迹膜再生液覆盖蛋白印迹膜,并在室温条件下轻柔洗涤10分钟。
更换新的温和型蛋白印迹膜再生液覆盖蛋白印迹膜,并在室温条件下轻柔洗涤10分钟。
将蛋白印迹膜在 TBST或 PBST 中洗涤 5 分钟。
使用封闭缓冲液封闭蛋白印迹膜,即可进行第二次Western blot 检测。
注意事项:
温和型蛋白印迹膜再生液为即用型,不建议稀释使用。
这个产品是酸性的。使用该产品时,应穿实验服,戴手套。
温和型蛋白印迹膜再生液无法破坏生物素化靶蛋白与亲和素结合探针之间的相互作用。
在进行膜再生后对多种抗原进行探测时,建议优先探测其中的低丰度蛋白。
建议在膜再生后重新封闭膜,再进行第二次Western blot 检测。
显色检测试剂(如碱性磷酸酶底物BCIP/NBT)会在膜上留下永久可见的污点,这可能会干扰对类似分子量目的蛋白质的后续检测。化学发光推荐使用ECL等试剂,因为它们不会留下污渍,而且ECL比显色检测试剂更敏感。
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